高通量测序在病原微生物学方面的研究进展

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高通量测序在病原微生物学方面的研究进展

　　近年来，随着测序技术的不断发展，实现对大量分离菌高通量，更准确的序列分析，以及对细菌种群进行高分辨率的系统发育分析，极大地提高了对病原微生物产生、适应和传播的认识。高通量测序（highthroughputgenerationsequencing，hts）技术是人类和动物基因组学研究领域中最热门的话题，与基于sanger方法的最复杂的毛细管测序仪相比，该技术可以产生的数据多100倍。

　　与传统的第一代测序，又称sanger测序相比，在dna测序方面，hts技术具有快速、廉价和高通量的优点，使得细菌基因组学研究发生了巨大的变化。高通量“台式”测序仪的出现的使实验室能够独立于专业测序中心进行测序工作，同时，hts高分辨率的特点可以确定病原菌克隆的分子机制，辅助研究人员推断出全球大流行以及局部暴发期间的传播途径，甚至可以对患者个体在感染期间进行细菌种群进化分析。与传统的杂交方法相比，hts还提供了转录组分析的潜力，包括覆盖全基因组范围及准确定量等，且深度测序辅助对细菌突变体文库的构建，以确定病原菌在体内生长或在其他特定生长条件下存活所需的决定因素。本文将对hts在细菌病原体方面的近期研究进展进行阐述。

　　一、感染过程中细菌进化的研究

　　感染性疾病的进展和结果往往取决于宿主与病原体如何相互作用，采用hts技术进行的研究为定殖和感染过程中细菌病原体的进化提供了新的见解。例如，研究发现，在感染过程中，由于选择性压力（例如与其他微生物共同感染、宿主的免疫反应及抗生素…………

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